菌落總數的測定方法

迅數科技

　　菌落總數的測定方法主要包括以下步驟：
　　1、樣品處理和稀釋
　　無菌操作：取檢樣25g（或25ml），放于225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內（瓶內預置適當數量的玻璃珠）或滅菌乳缽內，經充分振搖或研磨制成1:10的均勻稀釋液。
　　固體檢樣：在加入稀釋液后，最好置滅菌均質器中以8000~10000r/min的速度處理1min，制成1:10的均勻稀釋液。
　　稀釋液制備：用1ml滅菌吸管吸取1:10稀釋液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內，振搖試管混合均勻，制成1:100的稀釋液。
　　遞增稀釋：另取1ml滅菌吸管，按上項操作順序，制10倍遞增稀釋液，如此每遞增稀釋一次即換用1支1ml滅菌吸管。
　　2、傾注培養
　　選擇稀釋度：根據標準要求或對污染情況的估計，選擇2~3個適宜稀釋度，分別在制10倍遞增稀釋的同時，以吸取該稀釋度的吸管移取1ml稀釋液于滅菌平皿中，每個稀釋度做兩個平皿。
　　傾注培養基：將涼至46℃營養瓊脂培養基注入平皿約15ml，并轉動平皿，混合均勻。同時將營養瓊脂培養基傾入加有1ml稀釋液（不含樣品）的滅菌平皿內作空白對照。
　　3、培養和計數
　　培養條件：待瓊脂凝固后，翻轉平板，置36±1℃溫箱內培養48±2h，取出計算平板內菌落數目，乘以稀釋倍數，即得每克（每毫升）樣品所含菌落總數。
　　計數方法：菌落計數時，從低稀釋度的平板開始計數。若所有平板上的菌落數均小于30CFU，則需計數所有平板上的菌落數，但僅采用最接近30CFU的兩個平板的菌落數來計算最終菌落數。
　　4、結果報告
　　報告方式：菌落數小于100CFU時，按“四舍五入”原則修約，以整數報告。菌落數大于或等于100CFU時，第3位數字采用“四舍五入”原則修約后，取前2位數字，后面用0代替位數；也可用10的指數形式來表示，按“四舍五入”原則修約后，采用兩位有效數字。
　　特殊情況：若所有平板上為蔓延菌落而無法計數，則報告菌落蔓延。若空白對照上有菌落生長，則此次檢測結果無效。稱重取樣以CFU/g為單位報告，體積取樣以CFU/mL為單位報告。
　　在進行菌落總數測定時，需要嚴格遵守無菌操作規程，以避免外部污染對結果的影響。此外，培養箱的條件應根據具體的實驗要求進行設置和控制，以確保培養環境的穩定性和準確性。

花開半夏

厲害了，我的樓！

秋天的童話

學到了新知識，感謝樓主的分享！